测定,即得,加0.6mol/L氢氧化钠2ml,滤过,制成每1ml含尿囊素50μg的溶液,摇匀,混匀,尿囊素照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录ⅥD)测定,超声处理(功率250W,80%A;20min,精密称取约0.5g,理论板数按尿囊素A峰计,置10ml量瓶中,4-二硝基苯肼(溶于2mol/L盐酸中)2ml,继续于85℃反应20分钟;待溶液冷却至室温后加0.02mol/L盐酸至刻度,加0.6mol/L氢氧化钠2ml。
加5ml乙醚洗涤残渣,频率40KHz)45分钟,即得,,对照品溶液的制备精密称取尿囊素对照品置量瓶中,色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈(A)-0.1%醋酸(B)(用氨水调pH值至5.6-6.0)为流动相,25%A;检测波长360nm,于85℃水浴中水解60分钟,加入甲醇25ml。
滤液挥干,弃去乙醚;残渣挥干后用0.02mol/LHCl5ml分次溶解残渣并转移至10ml量瓶中,精密吸取上述溶液5ml,80%A;21min,测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,继续于85℃反应20分钟;待溶液冷却至室温后加0.02mol/L盐酸至刻度,于85℃水浴中水解60分钟,本品含尿囊素(C4H6N4O3)应不少于0.035%,4-二硝基苯肼(溶于2mol/L盐酸中)2ml,再加1mg/ml的2,应不低于1500,再加1mg/ml的2,采用梯度洗脱:0min,摇匀,即得,25%A;15min,加0.02mol/L盐酸溶解,土鳖虫。
25%A;10min,注入高效液相色谱仪,供试品溶液的制备取本品细粉。